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1. 复溶时间
复溶时间是高浓度蛋白质冻干中的另一个关键点，如图1中对于蛋白质冻干产品来说，随着浓度增高，复溶时间也随之增长。这里主要有两个原因：蛋白质浓度增高，导致产品固含量增加，干燥后粉饼的比表面积下降，复溶时间延长；蛋白质浓度增高，使粉饼润湿性下降，复溶时间延长。
图1-蛋白质浓度与复溶时间的关系①
2. 影响复溶时间的因素
复溶方式
图2-三种复溶方式下不同蛋白质浓度的
冻干产品与复溶时间的关系②
图2实验中的复溶方式包括，第一种快速复溶（Fast）：注入WFI后，平缓晃动10s，保持瓶竖直，观察10s，再晃动10s，重复直到完全溶解。第二种中速复溶（Medium），减少晃动频率：注入WFI后润湿角，平缓晃动10s，保持瓶竖直，静待5min，每5分钟晃动10s，重复直到完全溶解。第三种低速复溶（Slow）：注入WFI后，平缓晃动10s，保持瓶竖直，直到完全溶解，每5min观察一次。
随着蛋白质浓度的变化，复溶方式对粉饼复溶时间影响也不同。从图2可以看到在蛋白质浓度为100mg/mL时，采用不同方式下粉饼的复溶时间差异最大，晃动频率高，复溶时间短。但目前没有统一的复溶方式，类似于ISO制定的标准，所以不同研究机构使用的复溶方式可能也有差别。
辅料-糖类
图3-含蔗糖、海藻糖的辅料复溶时间与蛋白质浓度的关系①
图3实验中，随着蛋白质浓度增高，加入糖类的辅料复溶时间比没有糖类的时间短，因为糖类可以提升粉饼润湿性，所以复溶速率相对加快。
图4-蛋白质和糖类比重与复溶时间的关系③
当蛋白质 ：糖类比重 > 1时，复溶时间增长较大，可能在比重 ＜1时润湿角，两者比重对复溶时间影响不大。
辅料-甘露醇
图5-蛋白质浓度和甘露醇晶体状态与复溶时间的关系
（Cycle1无退火，Cycle2退火）③
在实验中发现甘露醇结晶可缩短复溶时间，但蛋白质浓度在140mg/mL和70mg/mL时，甘露醇为晶体和非晶体状态的复溶时间差异很小。根据表格1当蛋白质浓度低时，甘露醇结晶程度差异较小，蛋白质浓度较高时，甘露醇以非晶体形式存在，对甘露醇结晶存在抑制作用。
表格1-蛋白质浓度和预冻处理对甘露醇结晶的影响
通常情况，粉饼是非晶体状态比晶体状态复溶时间短。粉饼复溶过程一般有四个阶段，首先是粉饼润湿受粉饼润湿性影响；其次是复溶液体穿透至粉饼内部，受粉饼孔径/孔隙率和粉饼润湿性的影响；在此之后粉饼开始分解，受粉饼对外力的抵抗能力影响；最后粉饼分解成颗粒进一步被渗透，受粉饼颗粒大小和溶解性影响。
辅料甘露醇-润湿性
表格2-晶体甘露醇和海藻糖在粉饼中的比重
与所测湿润角的关系③
在实验中，当晶体甘露醇（δ型）比重降低，测量的湿润角存在上升趋势，粉饼润湿性下降，粉饼润湿性通过与甘露醇和海藻糖两者之间的函数关系计算。如下：
通过公式计算得到图6：
图6-蛋白质浓度和甘露醇晶体状态与湿润角的关系，
不退火是淡蓝色柱状图，退火是蓝色柱状图③
退火之后随着晶体甘露醇（δ型）比重上升，所测量的润湿角减小，致使粉饼润湿性提高。
辅料甘露醇-液体穿透粉饼能力
图7-蛋白浓度和甘露醇晶体状态与液滴穿透粉饼时间的实验关系
不退火是淡蓝色柱状图，退火是蓝色柱状图③
在实验中，当粉饼的晶体甘露醇（δ型）比例增加时，液滴穿透粉饼能力加强，时间明显减少。需要注意的是液体穿透粉饼能力受两个因素影响，分别为孔径/孔隙率和复溶液体粘度。该实验采用可控结晶，使测试样品的孔径和孔隙率基本一致，复溶液体为饱和甘露醇/海藻糖溶液，避免粉饼溶解和粘度变化带来的影响。在测试复溶时间的实验中，决定性影响因素是粉饼的润湿性。退火后的产品粉饼润湿性上升，液体穿透粉饼能力加强。
辅料甘露醇-粉饼抵抗外力能力
图8-质构仪分析压力对位移的曲线，
(Cycle1无退火，Cycle2退火)③
图9-蛋白浓度和甘露醇晶体状态与抗压能力的关系
不退火是淡蓝色柱状图，退火是蓝色柱状图③
通过图8实验，使用第一阶段的压力-位移斜率表征抗压能力，为图9纵坐标，在实验中甘露醇结晶后，粉饼抗压能力下降，晶体甘露醇形成微观不连续性，成为薄弱点，使整个粉饼更脆弱。
使用复溶液体溶解粉饼时，当粉饼润湿性高，粉饼孔径/孔隙率大，粉饼对外力的抵抗能力较弱，有利于加快复溶速率。相对重要的因素是粉饼孔径/孔隙率，其直接影响液体穿透至粉饼内部的能力。这不仅影响高浓度蛋白质冻干粉饼复溶时间，也同样影响大部分冻干产品的复溶速率。
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